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脑肠肽Ghrelin对脓毒症患者胃肠道功能障碍的机制研究

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放大字体  缩小字体    发布日期:2019-08-13  来源:曝光台  作者:baoguangtai  浏览次数:857
李斌   摘要:目的研究脓毒症时脑肠肽Ghrelin对胃肠道内激素分泌功能、胃粘膜细胞损伤、消化吸收动力功能的影响及机制,为Ghrelin预防和治疗脓毒症时胃瘫、应激性溃疡与肠吸收功能障碍提供理论基础和新的有效的途径。方法1)通过文献计量学分析,即对脑肠肽相关的文献进行可视化分析,明确目前脑肠肽的研究现状、热点及未来趋势。2)Ghrelin对脓毒症大鼠分泌功能、消化吸收动力功能的影响。将72只雄性Wistar大鼠随机分为6个组,分别是脓毒症组、对照组(正常非手术组)、假手术组、GHRP-6组、Ghrelin组、Obestatin组,每组12只,并给予干预措施后2h、4 h、8 h、12 h分别处死3只大鼠,取胃,收集胃液并测量胃液的体积,激光多普勒方法检测胃大弯处血流量。3)将36只雄性Wistar大鼠随机分为3个组,假手术(sham)组(实验开始前2 h腹腔内注射生理盐水,麻醉后行开腹手术,不做模型诱导);脓毒症组[实验开始前2 h腹腔内注射生理盐水,麻醉后盲肠结扎穿孔(Cercal ligation and puncture,CLP)建立腹腔感染模型]、Ghrelin组(于术后2 h、4 h、8 h注射Ghrelin),各组于术后12 h采集标本,用TUNEL法检测胃组织细胞凋亡,免疫组化、荧光定量PCR和Western-blot法检测大鼠胃组织Bcl-2和Bax蛋白表达的变化。流式细胞仪检测Ghrelin对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)在体外诱导的胃粘膜细胞凋亡的影响。结果1)目前脑肠肽研究主要涉及脑肠肽的产生、性质、生理作用和脑肠肽的调节等方面。脑肠肽的本质为一种激素,主要生理作用为调节胃肠动力、保护胃肠粘膜、改善胃肠功能障碍等作用。同时具有促进进食、刺激胃液分泌。脑肠肽可以通过增加胃黏膜血流量、促进胃收缩、剂量依赖性降低胃黏膜细胞的凋亡。但是存在一定争议。2)对照组(正常非手术组)与假手术组在各时间点的胃液体积方面无差异(P0.05)。与假手术组相比,脓毒症组在干预后2 h、8 h、12 h存在胃液体积减低(均P0.05),但在干预后4 h差异无统计学意义(P0.05)。与假手术组和脓毒症组相比,Ghrelin组在干预后2h起胃液体积即明显升高(均P0.05),且呈时间依赖性。GHRP-6组与假手术组、脓毒症组及Ghrelin组比较,在干预后2h起胃液体积即明显升高(P0.05),且呈时间依赖性。Obestain组与其余各组比较,在各时间点差异均有统计学意义(均P0.05)。脓毒症组胃大弯处血流明显减低(284.31±95.66),与正常组相比差异具有统计学意义(P﹤0.05),Ghrelin组与脓毒症组相比,差异具有统计学意义(P﹤0.05),Obestain组与Ghrelin组相比,差异具有统计学意义(P﹤0.05);3)术后2小时,CLP组Ghrelin mRNA水平明显低于假手术组。与假手术组相比,CLP组大鼠术后20h胃组织和体循环中的Ghrelin的蛋白水平均下调。Ghrelin的应用显著增加胃粘膜和血清中Ghrelin水平。CLP组循环和胃组织中的细胞因子的水平,包括TNF-α、IL-6和IL-1β,与假手术组相比均显著升高,而Ghrelin治疗可以逆转CLP诱导的升高。三组均可见凋亡细胞,脓毒症组、Ghrelin治疗组大鼠胃组织细胞TUNEL平均光密度(MOD)均高于sham组;Ghrelin治疗组MOD较CLP组明显降低(P0.05)。与sham组比较,CLP组、Ghrelin组大鼠胃组织Bcl-2 mRNA较sham组明显降低,Bax-mRNA较sham组明显升高,差异有统计学意义(P0.05);与CLP组比较,Ghrelin组大鼠胃组织Bcl-2 mRNA明显升高,Bax-mRNA明显降低,差异均有统计学意义(P0.05)。与sham组比较,CLP组、Ghrelin组大鼠胃组织Bcl-2较正常组明显降低,Bax较sham组明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。体外LPS刺激大鼠胃粘膜上皮细胞后,未用Ghrelin治疗的胃粘膜上皮细胞凋亡细胞的比例比Ghrelin治疗组明显增高。结论 通过全面检索分析,Ghrelin对于脓毒症胃肠道功能障碍的研究较少,大部分研究者认为Ghrelin可以调控胃肠道功能,促进脓毒症的胃粘膜修复、减少肠道屏障障碍发生。我们的研究结果表明,脓毒症时胃组织细胞抑凋亡基因Bcl-2表达减少,而促凋亡基因Bax表达增多;应用Ghrelin可以上调胃组织细胞抑凋亡基因Bcl-2的表达,减少促凋亡基因Bax的表达。Ghrelin能通过神经-体液途径有效调控胃肠功能,从而促进大鼠胃液分泌,提高胃黏膜血流灌注,减轻胃组织损伤。 学位授予单位:兰州大学
学位级别:博士
学位授予年份:2019
分类号:R459.7

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